嘧菌酯对马铃薯早疫病菌Alternaria,solani的毒力及防效

材料与方法

1.1 试验材料

供试马铃薯品种：米拉。

供试药剂：25%嘧菌酯悬浮剂（瑞士先正达作物保护有限公司），43%戊唑醇悬浮剂（德国拜耳作物科学公司），50%多菌灵可湿性粉剂（江苏镇江建苏农药化工有限公司），80%代森锰锌可湿性粉剂（北京燕化永乐农药有限公司）。

供试培养基：PCA培养基：马铃薯100 g/L，胡萝卜100 g/L，蔗糖10 g/L，琼脂15 g/L。

1.2 试验方法

1.2.1 病原菌的分离、纯化与鉴定 在发病季节采集具有典型早疫病症状的马铃薯叶片，采用单病斑组织分离方法，对所得菌株进行形态学鉴定，并采用科赫氏法则进行回接验证，最终得到试验所需菌株[9]。

1.2.2 病原菌对嘧菌酯的敏感性测定 采用分生孢子萌发法测定嘧菌酯敏感性[9]。嘧菌酯浓度分别为0、0.001、0.01、0.10、1.00和10.00 mg/L，每个浓度3次重复。利用软件DPS 7.05计算EC50值。嘧菌酯的敏感性用相对抑制分生孢子萌发率50%的有效浓度（EC50）表示。

1.2.3 嘧菌酯对马铃薯早疫病的田间防治试验 试验地设在恩施市三岔乡，其海拔1 000 m，肥力中等，所有试验小区的栽培条件基本一致。试验播种时间为2014年2月27日，第1次施药于5月28日，第2次施药于6月4日，第3次施药于6月11日，6月30日收获测产。试验设5个处理，分别是25%嘧菌酯悬浮剂450 g/hm2，43%戊唑醇悬浮剂300 g/hm2，50%多菌灵可湿性粉剂1 500 g/ hm2，80%代森锰锌可湿性粉剂3 000 g/hm2，清水处理作对照。每处理4次重复，采用随机区组排列，共计20个小区，小区面积13.34 m2，每小区设5行，共80株，走道0.4 m。在马铃薯早疫病发病初期进行施药，施药方法为常规喷雾，每个小区用药液量为1.2 kg。施药器械为“金原野”3WBD-20背负式电动喷雾器。

调查各试验小区马铃薯早疫病发病情况，药前调查病情级别，并于第1次药后7 d、第2次药后7 d、第3次药后7 d和14 d，共调查5次。采用每个小区5点取样法，每个点调查10株，计算病情指数和防治效果，对防效进行显著性分析（新复极差法）。收获时各小区计产，并进行产量比较。病害分级标准采用《田间药效试验准则》[10]。

病情指数=[∑（各级病叶数×相对级数值）/（调查总叶数×9）]×100；

防治效果（%）=[1-（对照区药前病情指数×处理区药后病情指数）/（对照区药后病情指数×处理区药前病情指数）]×100。

2 结果与分析

2.1 病原菌的分离与鉴定

从西南北部3个调查地区共采集样品经分离纯化后最终得到63株分离物，其中陕西安康地区16株、湖北恩施地区20株，四川西昌地区27株。所有分离物经25℃光照培养10 d后，显微镜下观察均能发现分生孢子。观察发现分生孢子形态及大小，与《中国真菌志》[11]所记载特征相吻合。分生孢子梗单生或簇生，分生孢子单生，暗褐色，倒棍棒形至长椭圆形，大小为85～180 µm×15～19 µm，有多个纵横隔膜，有长喙。采用科赫氏法则进行回接验证，均能使叶片发病，初呈深褐色或黑色小斑点，逐渐扩大，7～10 d后能观察到典型的同心轮纹状病斑，且能从发病叶片上再次分离到早疫病菌。

2.2 嘧菌酯对马铃薯早疫病菌的毒力测定

测定了嘧菌酯对陕西安康10株、湖北恩施10株和四川西昌10株马铃薯早疫病菌的毒力（图1），结果显示：所有测试菌株对嘧菌酯均表现高度敏感，没有抗性菌株出现。在测定陕西安康菌株毒力测定中，嘧菌酯EC50介于0.007 6～0.049 8 mg/L之间，最不敏感菌株的EC50值是最敏感菌株的6.6倍；在湖北恩施菌株毒力测定中，嘧菌酯EC50介于0.009 3～0.056 3 mg/L之间，最不敏感菌株的EC50值是最敏感菌株的6.1倍；在四川西昌菌株毒力测定中，嘧菌酯EC50介于0.011 9～0.062 6 mg/L之间，最不敏感菌株的EC50值是最敏感菌株的5.3倍。

来源于3个地点的马铃薯早疫病菌对嘧菌酯的敏感性水平基本相同，均没有检测到抗性菌株。陕西安康、湖北恩施和四川西昌马铃薯早疫病菌对嘧菌酯的平均EC50值分别为0.024 4、0.025 6和0.037 6 mg/L，3地总菌株的平均EC50值为0.029 0 mg/L。其中，EC50在平均值以下的菌株有18株，占总数的60%。嘧菌酯对不同地区马铃薯早疫病菌各10株敏感性测定EC50值的分布依次按<0.02 mg/L、（0.02～0.04）mg/L、>0.04 mg/L 3个区域划分，陕西安康和湖北恩施早疫病菌株的比例均为50%、30%和20%，四川西昌早疫病菌株的比例分别是40%、20%和40%（表1）。

2.3 嘧菌酯对马铃薯早疫病的防治效果

田间药效试验结果表明，在喷施25%嘧菌酯悬浮剂后对马铃薯早疫病具有良好的防治效果，增产效果明显。末次调查，25%嘧菌酯悬浮剂对早疫病的防效为84.61%，与药剂43%戊唑醇悬浮剂防效间差异不显著，但与80%代森锰锌可湿性粉剂、50%多菌灵可湿性粉剂防效间差异都达到显著水平。测产结果（表2）表明，在施用25%嘧菌酯悬浮剂防治马铃薯早疫病后，马铃薯产量达到31 087.5 kg/hm2，增产效果显著，比清水对照增产9.84%，但与其他药剂处理后对马铃薯的增产效果相互之间无显著性差异。

3 讨 论

研究结果表明，嘧菌酯表现出对马铃薯早疫病较好的室内抑菌效果和田间防效。试验中选择陕西安康、湖北恩施、四川西昌等西南北部马铃薯主产区的30株马铃薯早疫病菌菌株，未出现对嘧菌酯产生抗性的菌株，嘧菌酯对该区域内早疫病菌群体的毒力EC50为0.007 6～0.062 6 mg/L，与周园、Pasche等报道的早疫病菌对嘧菌酯的敏感性基线EC50范围（0.01～0.13 mg/L）接近[8，12]。从田间防效来看，25%嘧菌酯悬浮剂对马铃薯早疫病的防治效果显著，能有效地控制马铃薯早疫病的发生与危害，除了与43%戊唑醇悬浮剂的防效之间差异不显著以外，与其他两种药剂50%多菌灵可湿性粉剂、80%代森锰锌可湿性粉剂防效间差异均达到显著水平。与清水对照相比，25%嘧菌酯悬浮剂增产效果显著，其增产率也高于其他常规杀菌剂，这与嘧菌酯对早疫病菌表现出较高的室内毒力测定结果一致。因此，嘧菌酯可作为该区域内防治马铃薯早疫病的优选药剂。

嘧菌酯作为一种防治马铃薯早疫病的新型杀菌剂，虽然具有杀菌范围广、对非靶标作物和环境安全、促进植物生长等优点，但也属于高抗性风险药剂，且单一药剂的频繁使用会导致病菌抗药性的产生，如番茄叶霉病菌、小麦白粉病、黄瓜霜霉病和瓜类灰霉病等都发现了抗药性菌株[6-7， 13-15]。为了减少抗药性的产生，建议将嘧菌酯与其他作用机制不同的杀菌剂轮换或混合使用。受采样地点、样本数量的限制，选择的马铃薯早疫病菌数量基数较小，田间药效试验为一年一点试验，嘧菌酯对西南北部地区马铃薯早疫病的长期防效有待进一步研究。

参考文献：

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[5] 张舒压， 周明国. 甲氧丙烯酸酯类杀菌剂的生物学及应用技术研究[J]. 中国植物病害化学防治研究，2002，（3）：1-10.

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[11] 张天宇. 中国真菌志（第十六卷）[M]. 北京：科学出版社，2003.

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（责任编辑：夏亚男）

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