富硒鸡不同部位硒含量及脂肪酸组成研究

材料与方法

1.1 材料与试剂

材料：富硒鸡（京红，9月龄）。

试剂：硝酸（色譜纯 Fisher）;硒标准溶液（18D7270 国家金属及电子材料分析测试中心）;正己烷（色谱纯 kermel）;三氯化硼-甲醇络合物（aladdin）;甲醇、三氯甲烷、正己烷、冰醋酸、甲苯（均为分析级，购自三鹰化学试剂有限公司）。

1.2 仪器与设备

PL602-E电子天平（Mettler Toledo，瑞士）;MARS 5 xpress微波消解仪（美国）;09C20恒温电热板（通博）;ICAP 7400 ICP-MS（Thermo，美国）;7890-5977A GC-MS（Agilent，美国）;DB-225色谱柱（岛津，日本）;MD 200氮吹仪（杭州奥盛）;B-260恒温水浴锅（上海亚荣）;WH-86涡旋振荡仪（太仓华利达）;DHG-系列恒温干燥箱（上海一恒）。

1.3 实验方法

1.3.1 样本采集

用不锈钢剪刀从富硒鸡分别采集皮、褐色脂肪、白色脂肪、胸肌、腿肌、肌胃、心脏、肾脏、肝脏、蛋，装入冷冻管中，于-80℃低温冰箱备用。

1.3.2 硒含量检测

（1）样品前处理。准确称取0.200 g鸡不同部位（皮、褐色脂肪、白色脂肪、胸肌、腿肌、肌胃、心脏、肾脏、肝脏、蛋）于微波消解罐中，加入10 mL硝酸，按表1所示消解条件开始消解样品。消解结束后，取下冷却。于恒温电热板中蒸发硝酸，至近干，用超纯水冲洗消解罐3次，将溶液转移至10 mL容量瓶，用超纯水定容至刻度;同时做试剂空白。

（2）标准液配制。10 μg/mL的硒标准中间溶液：移液枪准确吸取1 mL浓度为1000 μg/mL的硒标准液，置于100 mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，得到质量浓度为10 μg/mL的硒标准中间溶液。

100 ng/mL的硒标准使用液：移液枪准确吸取1 mL浓度为10 μg/mL的硒标准中间液，置于100 mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，得到质量浓度为100 ng/mL的硒标准使用溶液。

硒标准系列溶液：移液枪分别吸取0、5 mL、10 mL、15 mL、20 mL、25 mL浓度为100 ng/mL的硒标准使用液，置于6个不同的100 mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，得到浓度分别为0、5 ng/mL、10 ng/mL、15 ng/mL、20 ng/mL、25 ng/mL的硒标准系列溶液。

（3）样品测定。仪器开机至稳定，依次测定标准曲线、空白溶液和样品。

仪器参数：等离子体功率：1.5KW;冷却气流量：14 L/min;辅助气流量：0.8 L/min;雾化器流量：1.0 L/min;泵速：40 r/min;接口温度：32℃。

1.3.3 脂肪酸组成检测

（1）脂肪酸提取。分别称取富硒鸡组织（褐色脂肪、白色脂肪、胸肌、腿肌、皮）样本0.5g;将样本置于试管内加甲醇∶氯仿=1∶1溶液5 mL，振荡20 min;过滤，取氯仿层;氮气吹干。

（2）脂肪酸甲酯化。取脂肪酸提取物，加甲苯与三氟化硼-甲醇络合物，于60℃下水浴加热60 min;冰水冷却，加蒸馏水、正己烷、醋酸混匀，在3000 r/min下离心10 min;取正己烷层于新试管1，水层中加入1 mL正己烷重复操作;合并正己烷层，加入4 mL蒸馏水，将正己烷转移到新试管中2;水层中加入1 mL正己烷，合并到新试管2;用氮气吹干正己烷。

（3）样品分析。用色谱级正己烷溶解样品，准备GC-MS分析。

GC工作条件：N2为载气;5∶1分流比;进样口温度为270℃;检测温度为280℃;升温程序为起始温度120℃，维持5 min，以5℃/min升至190℃，维持12 min，再以2.5℃/min升至210℃，保持10 min;检测器气体为40 mL/min氢气;高压空气450 mL/min，氮气尾吹气30 mL/min。

MS工作条件：EI离子源;离子源温度为230℃;四级杆温度为150℃;溶剂延迟2.5 min;质子扫描范围m/z为50～550。

2 结果

2.1 富硒鸡组织中硒含量分布

硒标准液的标准曲线为Y=1062.7781×X+728.9129，R2=0.9934，呈现良好的相关性。富硒鸡中各部位硒含量（以干重计），由表2可知，含硒量最高的部位是肌胃，达到了2639.19 ng/g，这可能是因为鸡摄食富硒饲料最先到达胃部，所以在肌胃中硒的累积最多;而含硒量最低的部位在胸肌，为129.76 ng/g。

2.2 富硒鸡不同组织中脂肪酸组成

褐色脂肪是负责分解引发肥胖的白色脂肪组织，将其转化成二氧化碳、水和热量。它可以加快人体新陈代谢，促进白色脂肪消耗。白色脂肪是脂肪组织的一种，和褐色脂肪相对应，主要功能就是把多余的脂肪存储在体内。如表3所示，白色脂肪中饱和脂肪酸相对含量最高，为88.07%;褐色脂肪中饱和脂肪酸相对含量次之，为87.91%。胸肌中不饱和脂肪相对含量高达68.44%;腿肌和皮中不饱和脂肪酸相对含量分别为32.43%和29.03%。

3 结论

硒在鸡体内的分布具有很强的差异性，其含量分布依次为肌胃>白色脂肪>皮>蛋>肾脏>肝脏>腿肌>心脏>褐色脂肪>胸肌。其中，肌胃中硒含量最多，这可能是因为硒最先到达胃部，所以在胃中的累积最多。饱和脂肪酸相对含量依次为白色脂肪>褐色脂肪>皮>腿肌>胸肌;不饱和脂肪酸相对含量依次为胸肌>腿肌>皮>褐色脂肪>白色脂肪;其中胸肌的脂肪组成最为合理，较高的不饱和脂肪酸比例有益于对人体健康。不同组织中硒的分布及脂肪酸的組成除了受饲料的影响外，鸡的性别、月龄及饲养方式等都有可能影响硒的分布及脂肪酸组成，本研究并未对其他因素进行控制，因此需要进一步的研究。

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